Жасушалық (клеткалық) технология туралы қазақша

Алғышарты дамыту жасушалық инженерия, адам және жануарлар болды әдістерін әзірлеу өсіру, олардың соматикалық жасушалар жасанды қоректік орталарда, сондай-ақ гибридтерін алу соматикалық жасушаларының қоса алғанда, межвидовые будандары. Өз кезегінде, жетістіктері культивировании соматикалық жасушаларының әсер етті зерделеу жыныс жасушалары және ұрықтану адам және жануарлардың. Бастап 60-шы жж. бірнеше зертханаларда әлем орындалды көптеген эксперименттер ауыстыру бойынша ядросының соматикалық жасушалардың аналық, жасанды айырылған ядролардың. Нәтижелер бұл эксперименттер жиі болды қарама-қайшы, бірақ жалпы алғанда, олар әкеп соқты ашу қабілетін жасушалық ядролардың қамтамасыз етуге қалыпты дамуы жұмыртқа

Зерттеудің нәтижелері негізінде дамыту оплодотворенных жұмыртқа 60-шы жылдары басталды, сондай-ақ зерттеу бойынша анықтауға мүмкіндік ұрықтандыру аналық ұрықты ағзадан тыс ана. Өте тез бұл зерттеулер әкелді ашу мүмкіндігі ұрықтандыру жұмыртқа сперматозоидами » пробиркада және одан әрі дамыту, білімді осы жолмен ұрық имплантациялау кезінде олардың әйелдің жатырдың. Одан әрі жетілдіру бойынша әзірленген осы әдістерді әкелді, бұл рождение «пробирочных» балалар ақиқатқа айналды. Қазірдің өзінде 1981 ж. әлемде рождено 12 бала, өмір, олар берілді, зертханада, пробиркалар. Қазіргі уақытта бұл тарау жасушалық инженерия алды үлкен тарату, сондай-ақ «пробирочных» балалар қазірдің өзінде ондаған мың. Біздің елімізде жұмыс алу бойынша «пробирочных» балалар басталып, 1986 ж. 1993 жылы әзірленген әдістемесі алу монозиготных егіз адамның in vitro, бөліну жолымен эмбриондарды арналған бластомеры және доращивания соңғы 32-ге дейін жасушаларының, содан кейін олар болуы мүмкін имплантированы әйелдің жатырдың.

Әсерінен нәтижелерін алуға байланысты «пробирочных» балалар, жануарларда да әзірленді технологиясы атау алған эмбриондарды трансплантациялау. Ол әзірлеумен байланысты тәсілі индукция полиовуляции әдістері, жасанды ұрықтандыру аналық ұрықты имплантациялау және ұрығының жануарлар организміне қабылдау аналар. Мәні бұл технология азайтатын келесі. Высокопродуктивной танылды енгізеді гормондар, нәтижесінде туындайды полиовуляция саятын пісу бірден 10-20 жасушалар. Содан кейін аналық жасуша жасанды оплодотворяются бермек половыми жасушаларының яйцеводе. 7-8-ші күні ұрығының жуу қажет из жатырдың және трансплантируют » жатырдың басқа коровам (асырап алушы аналарға), содан кейін олар береді өмір телятам-близнецам. Бұзаулар мұрагер болмайды генетикалық мәртебесі өз түпнұсқа ата-аналар.

Басқа облысымен жасушалық инженерия жануарларда алу болып табылады трансгендік жануарлар. Ең қарапайым тәсілі осындай жануарларды енгізу кезінде жасалады да аналық жасуша бастапқы жануарлардың сызықтық молекулалардың ДНК. Жануарлар, развившиеся бірі оплодотворенных осылайша аналық жасушалар болады ұстауға бірі өз хромосомалардың көшірмесін енгізілген гена. Оның үстіне, олар беруге болады бұл ген бойынша мұрагерлік. Аса күрделі тәсілі трансгендік жануарларды алу үшін әзірленген мышах ерекшеленетін бояу жүн жабындысының және азайтатын келесі. Алдымен ағзадан беременной сұр тышқандар извлекают төрт күндік ұрық және уатады олардың жекелеген жасушалары. Содан кейін * региональды жасушаларының извлекают ядро, ауыстырады, олардың жұмыртқа, қара тышқандар, алдын-ала айырылған ядролардың. Аналық қара тышқандар, құрамында бөтен ядро, орналастырады пробиркалар қоректік ерітіндімен одан әрі дамыту үшін. Развившиеся бірі-жұмыртқа, қара тышқандар ұрығы имплантируют » жатырдың ақ тышқандарды. Орындалған бұл әдістеме бойынша эксперименттер бес ақ тышқандарды («қабылдау» аналар) алынды 36 тышқандар, олардың арасында үшеуі сұр. Осылайша, осы эксперименттер алуға қол жеткізді тип тышқандардың сұр бояумен жүнді жамылғысының, т. е. клонировать эмбриональные жасушалары өзіне тән қасиеттері бар. § 35 біз нәтижелерін қарастырып, жасанды ұрықтандыру айырылған ядролардың жұмыртқа қой ядролық материалмен соматикалық жасушалары, жануарлар осы түрі. Атап айтқанда, жұмыртқа қой удаляли ядро, содан кейін осындай жұмыртқа жасайтын ядросының соматикалық жасушалардың (*региональды, жеміс немесе жасушалардың ересек жануарлар), содан кейін ұрықтандырылған осылайша аналық енгізеді жатырдың ересек қой. Рождающиеся ягнята болды ұқсас қой-донорға. Атап өтілгендей, § 35, осындай алу трансгендік жануарларды білдіреді тікелей жолы жануарларды клондау шаруашылық-пайдалы белгілері бар қоса алғанда, дарақтардың белгілі бір жынысты.

Трансгендік жануарлар алынған, сондай-ақ пайдалану кезінде бастапқы материалдың тиесілі әр түрлі түрлері, атап айтқанда, белгілі беру тәсілі гена, бақылаушы өсу гормоны, егеуқұйрықтардың аналық тышқандар, сондай-ақ тәсілі құрамдастыру бластомеров қой бластомерами қозы әкеліп алу гибридті жануарлар (ковец). Бұл эксперименттер көрсетеді мүмкіндігіне түрлік сәйкессіздігі ең ерте даму кезеңдері. Әсіресе орталығы ашылады (егер көрнекі үйлесімсіздік болады тоқтатылды толығымен) жолында ұрықтандыру аналық жасушалардың бір түрін ядролармен соматикалық клеткалардың басқа түріне. Әңгіме туралы нақты перспективада алу шаруашылық-бағалы гибридтерін, жануарлар мүмкін емес алу арқылы будандастыру.

Айта кету керек, ядролық-трансплантационные жұмыс әлі де өте тиімді. Эксперименттер орындалған қос мекенділер мен сүтқоректілердің жалпы көрсеткендей, олардың нәтижелілігі шағын болып табылады, әрі ол сәйкессіздігі арасында донорлық ядролармен және реципиентными овоцитами. Сонымен қатар, кедергі жолындағы табыстарына, сондай-ақ пайда болған хромосомдық аберрациялар да трансплантированных ядроларындағы барысында одан әрі дамыту, қоса жүреді қаза трансгендік жануарлар.

Тоғысында зерттеу жұмыстарын будандастыруды жасушаларды және иммунологиялық зерттеулер туындады проблематикасы алуына байланысты, зерттеумен деп аталатын моноклоналды антиденелер. Жоғарыда атап өтілгендей, (қараңыз § 96), антиденелер, продуцируемые ағзаның жауап кіріспе антигенін (бактериялар, вирустар, эритроциттер және т. б.) білдіреді белоктар деп аталатын, иммуноглобулинами және құрайтын іргелі бөлігі қорғаныш жүйесі ағзаның қарсы ауруларының қоздырушыларын. Бірақ кез келген чужеродное тело енгізілетін, ағзаға, білдіретін қоспасы әр түрлі антигендер, олар қозғауға өнімге әр түрлі антиденелер. Мысалы, эритроциттер адам ие антигенами үшін ғана емес, қан тобы А (II) және (III), бірақ және басқа да көптеген антигенами қоса алғанда, резус-фактор. Бұдан әрі, белоктар жасуша қабырғасының бактерия немесе вирус капсида, сондай-ақ мүмкін ретінде әрекет әр түрлі антигендер туғызатын білімі, түрлі антиденелердің. Сол уақытта лимфоидные жасушалар иммундық жүйе ағзаның әдетте ұсынылған клонами. Демек, тіпті тек қана осы себеппен қан сарысуындағы иммунизированных жануарларға антиденелер әрқашан білдіреді қоспасы тұратын антиденелер, продуцируемых жасушалары әр түрлі клондар. Сонымен қатар практикалық қажеттіліктерін қажет антиденелер тек бір типті, яғни қажетті деп аталатын моноспецифические сарысуының құрамында антиденелер тек бір үлгідегі, немесе, олар деп атайды, моноклоналдық антиденелер.

Іздеу әдістерін моноклоналды антиденелерді алу швейцарскими зерттеушілер 1975 жылы ашылған будандарын алу тәсілі арасындағы лимфоцитами тышқандар, иммунизированных сол немесе басқа антигенмен және культивируемыми опухолевыми сүйек кемігі жасушалары. Мұндай гибридтер алды атауы «гибридомы». «Лимфоцитарной» бөлігінде ұсынылған лимфоцитом бір клон алдарына гибридома транспондердің қабілеті тудыруы білімі, қажетті антиденелерді де бір типті, ал арқасында «ісік (миеломной)» бөлігінде ол қабілетті барлық жасушаларына, шексіз ұзақ көбеюге жасанды қоректік орталарда бере қарасы көп популяциясына гибридом. Желісі мышиных жасушалар, синтезирующих моноклондық антиденелер бөледі біріктіру жолымен миеломных жасушаларының бастап лимфоцитами-дан көкбауырдың тышқандар, иммунизированной бес күн қалғанда бұл қалаулы антигенмен. Біріктіру жасушаларының жетеді араластыру олардың қатысуымен орайда полиэтиленгликольдің, ол индуцирует біріктіру жасушалық мембраналардың, ал содан кейін высеве оларды қоректік ортаға мүмкіндік беретін, өсуі және көбеюі тек гибридті жасушалар (гибридом). Көбейту гибридомы араластырады сұйық ортада, онда олар өседі (бұдан әрі-секретируют антиденелер в культуральную сұйықтық, әрі тек бір типті, сол неограниченных мөлшерде. Бұл антиденелер алды атауы моноклоналды.

Арттыру үшін жиілігін білім антиденелерді жүгінеді клонированию гибридом, яғни селекция жекелеген колониялардың гибридом, тудыруға қабілетті білімі барынша көп санын антиденелердің қалаған типті. Моноклондық антиденелер кеңінен қолданыс тапты медицинада диагностикалау және емдеу үшін бірқатар аурулар сол уақытта маңызды артықшылығы моноклональной технология ерекшелігі, оның көмегімен алынуы мүмкін антиденелер қарсы материалдарды тазарту мүмкін емес. Керісінше, алуға болады моноклондық антиденелер қарсы жасушалық (плазматических) нейрондық мембраналар жануарлар. Бұл үшін тышқан иммундайды мембраналармен бөлінген нейрондық, содан кейін олардың селезеночные лимфоциттер біріктіреді бастап миеломными жасушалары, ал әрі қарай түседі, жоғарыда сипатталғандай.

Клеткалық инженерия у өсімдіктер

Клеткалық инженерия у өсімдіктерді алуда өсімдіктердің бір жасушалар, сондай-ақ генетикалық манипуляциялар оқшауланған жасушалары бағытталған түрлендіру, олардың генотиптерінің.

Алу әдісі өсімдіктердің бір жасушалар негізделген қабілетін ұлпалар өсімдіктердің бірқатар түрлері — неорганическому өсуіне арнайы жасанды ортада, құрамында қоректік заттар мен өсуін реттегіштер. Кезінде культивировании ұлпалар өсімдіктердің осындай ортада көптеген жасушалар көрсетіледі қабілетті — шексіз көбейтуге құра отырып, қабаттар (массасын) недифференцированных жасушалар алған атауы каллуса. Егер содан кейін каллус бөлуге жекелеген жасушалары мен жалғастыру өсіру оқшауланған жасушалардың қоректік орталарда, онда жеке (дара) жасушалардың мүмкін дамуы мүмкін осы өсімдіктер. Қабілеті жеке соматикалық өсімдік жасушаларының дамуы осы (тұтас) өсімдік деп атайды тотипотентностыо. Мүмкін, тотипотентность жасушаларына да тән барлық листостебельных өсімдіктер. Бірақ әзірге ол табылды у өсімдіктердің шектелген шеңбер. Атап айтқанда, бұл қабілеті табылды у жасушаларының картоп, сәбіз, темекі және басқа да бірқатар түрлерін, ауыл шаруашылығы дақылдарының. Бұл әдіс жасушалық инженерия өсімдіктерді енді практикаға кеңінен. Алайда, өсімдіктер, развившиеся бір жасушалар сипатталады генетикалық тұрақсыздығына байланысты мутациями олардың хромосомалардың. Өйткені генетикалық тұрақсыздық береді әр түрлі нысандары, өсімдіктер, олар үшін өте пайдалы ретінде селекциясы үшін бастапқы материалды.

Алайда, өсімдіктер алуға болады және деп аталатын протопластов өсімдік жасушаларының, олар түсінеді жасушалар, олардың жасанды көмегімен гидролитических ферменттер (пектиназы және целлюлазы) алынып клетка қабырғасы. Әдетте протопласты алады жасуша жапырақтары, тамырлары, жапырақтары, прорастающей тозаңын, жемістерді және басқа да құрылымдардың өсімдіктер. Қабілеті протопластов беруге начало өсімдіктер анықталды бізде өте көп…..

Алу өсімдіктерді бір жасушалар немесе протопласта деп жиі атайды клональным микроразмножением. Главнейшее осы әдістің артықшылығы мынада: ол мүмкіндік береді күрт қысқартуға көбею мерзімдері көптеген өсімдіктер түрлерін, сондай-ақ өте жылдам ойнату бір зауытты жүз мың дана, бұл аса маңызды селекциялық және алу, отырғызу материалын незараженного аурулардың қоздырғыштарымен

Генетикалық манипуляциялар байланысты өсімдік жасушалары бағытталған түрлендіру генотиптерінің өсімдік жасушаларының, ол жетеді не арқылы соматикалық будандастыруды (алынған гибридті жасушалар) немесе ауыстыру жолымен жасушаның генетикалық материалдың шығатын басқа да организмдердің. Барлық жағдайларда бастапқы материал болып табылады протопласты жасушалар.

Соматическую будандастыруға жүзеге асырады бірнеше кезеңнен тұрады, атап айтқанда:

1. Алу және протопласттардың болып жатқан наурыздағы » өсімдік жасушаларының әр түрлі түрлері.

2. Өсіру гибридті протопластов пайдалана отырып, селективті қоректік орта.

3. Регенерация өсімдіктердің соматикалық гибридтерін (будандарын протопластов) білім беру арқылы соңғы каллуса.

Перенос генетикалық материалдың бір жасушалардың басқа жолымен жүзеге асырады трансформация протопластов чужеродной ДНК не енгізумен протопласты чужеродной ДНК көмегімен плазмид. Бірі пайда болатын содан кейін каллуса өсіріледі өсімдіктер, құрамында қызықтырған ген. Өсімдіктер осындай жолмен алынған деп атайды трансгенными өсімдіктер.

Әдебиеттер тізімі:

Биология. 2 кн. (Оқулық) Под ред. В. Н. Ярыгин (2003, 5-е изд., 432с., 3

Микробиология. (Оқулық) Гусев М. В. Минеева Л. А. (2003, 464с)

Биология экология негіздерімен. (Оқулық) Пехов А. П. (2000,