Мектеп, үй-жайлардағы микробиологиялық талдау

КІРІСПЕ

Ауа ортасы болып табылады, құрамында айтарлықтай микроорганизмдер саны. Ауамен олар ауыстырылуы мүмкін қашықтықтарға. Айырмашылығы-судың және топырақтың, онда микробтар болуы мүмкін өмір сүруге және көбеюге, ауада олар тек сақталады біраз уақыт, содан кейін өледі әсерінен бірқатар қолайсыз факторлардың: кебу, қолданылу күн радиациясының, ауысым температура, болмаған қоректік заттар және т. б. Неғұрлым тұрақты микроорганизмдер мүмкін ұзақ сақталуы ауада табыла онда үлкен көліктерден шығатын газдар. Осындай тұрақты микрофлоре ауа жатады саңырауқұлақ споралары мен бактериялар, сарцины және басқа да пигментообразующие коккалар.

Саны микроорганизмдердің ауада ауытқып елеулі шегінде және тәуелді метереологических шарттарын, қашықтық жер бетінен, жақын орналасқан елді мекендердің және т. б. ең Көп саны микробтардың құрамында ауа өнеркәсіптік қалалары, ең аз – ауа, ормандар, таулар [1]. Көптеген бактериялардың орналасқан үй-жайлардың ауасындағы, сөзсіз, жаппай жүруге (кинотеатрлар, театрлар, мектептер, вокзалдар және т. б.), сопровождающееся көтерумен шаң-тозаң [2].

Мақсаты осы жұмыс – зерттеулер негізінде анықтау ауаның ластану дәрежесі жабық мектеп үй-жайлар. Қойылған мақсатқа жету үшін қажет бірқатар міндеттерді шешуге:

1. анықтау микроорганизмдер саны, ұсталатын ауада әр түрлі үй-жайлар;

2. үйрену қарқынын ұстау микроорганизмдердің ауада ішінде оқу.

1. ТАЛДАМАЛЫҚ ШОЛУ

1.1 Өсіру бактериялар

Культивирлеу (өсіру) микробтардың, атап айтқанда бактериялардың жүргізіледі қоректік орталарда. Егу бактериялардың ортаны жасайды бактериялық ілгекпен (инемен), шпательмен, пастеровской немесе әдеттегі градуированной пипеткой.

Өскен жер бетінде тығыз орталарды оқшауланған жылжымалы бөліктер бетіндегі макроскопиялық жиналатын биомасс болып табылатын өнім көбеюі жалғыз ғана жасушалар. Деп аталады колониями. Колония білдіреді таза мәдениетін бактериялардың алатын, накопив арналған орталарда қолданады түрлік қасиетін анықтау үшін микроорганизмнің.

Әдістері мен техникасы себу материалдары мен мәдениеттер микробтардың. Егілген бактериялық ілгекпен арналған скошенную және сұйық ортаның: 1) пробиркаға таза шынықтырумен және бактериялардың бар түтікке арналған, стерилді незасеянной ортамен алады сол қолын ұстайды саусақпен » қиғаш, сондықтан, олардың мазмұн емес проливалось; 2) оң қолға, қауырсын, берут болады және тік күйінде стерильдейді жанарғының жалының; 30 пробиркалар бірі пробиркаларды шығарып алады бір мезгілде, зажимают олардың арасындағы мизинцем және алақанмен оң қолдың және сол сияқты күйдіреді өлке ашық пробиркаларды; 4)прокаленную болады пробиркаға енгізеді, салқындатады, с незасеянной ортамен ополаскивая болады сорпада немесе зигзагообразными қозғалыстармен бойынша таратылады шабылған беті аган; 5) болады извлекают, күйдіреді шетінен шыны түтіктерге және оларды жабады арқылы жүргізілген жалын тығындармен. Содан кейін бактериальную болады стерильдейді, пробиркалар надписывают және қояды штатив.

Егу градуированной немесе пастеровской пипеткой: пробиркалар ұстайды астында шағын бұрышпен, градуированную немесе пастеровскую пипетку арқылы жүргізеді жалын мен пәтерін жалдап, тығындар, түсіреді шыны түтікке, содан кейін насасывают белгілі бір материалды, ауыстырады және оны қоректік ортаға салынып выдувают. Пробиркалар жабады, ал тамшуырлар орналастырады дезинфекциялық ерітіндіге батырылады.

Егу уколом жүргізеді полутвердые агаризованные ортаның мясо – пептонный желатин, залитые пробиркаларға столбиком. Пробиркалар ұстайды вверх дном, насквозь прокалывая ортасын инемен немесе ілгекпен. Егу уколом да ауа температурасы қолданады өсіру үшін анаэробты микробтарды анықтау протеолитикалық қасиетін ұзақ сақтау дақылдар.

Егу да Петри тығыз қоректік ортасы жүзеге асырады шпательмен немесе бактериялық ілгекпен. Тығыз қоректік ортаны (МПА, Эндо, Левина, Плоскирева) разливают » тостаған былайша: флакон немесе түтікке балқытылған ортамен алады оң қолын сол қолмен шығарып алады тығынды, күйдіреді горлышко құты, үлкен және сұқ саусақпен сол қолдың аздап приподнимают қақпағын Петри, кетпей шеттерін қақпақтар, енгізеді оған горлышко флакондардың немесе шыны түтікке, наливая 15-20 мл. Тез жабады құты мен қақпағын. Петри шыны аяқты сәл покачивают біркелкі бөлу үшін қоршаған дейін қалдырады қату. Содан кейін ауыстырады, оны термостат, переворачивая вверх дном, қақпағын алып тастайды, кептіріп алады мұндай жағдайы 15-20 мин.

Шпательмен егу. Шпательдер дайындайды шыны таяқшалар қалыңдығы 4-5 мм, согнутых үшбұрыш, заворачивают қағазға құрғақ ауалы шкафта стерильдейді. Олар сондай-ақ, стерилизовать, смачивая спиртпен, оны кейіннен өртеу. Қатпарлы орта засевают шпательмен, шеңберлі қозғалысты бөле отырып бүкіл бетіне енгізілген орталығына Петри тамшысын материалды немесе жүзгін микробтардың. Кезінде егу қақпағын Петри қолдайды, сол қолымен кесе қалады аздап приоткрытой. Әрі қарай сол шпательмен кезекпен засевают екінші және үшінші Петри, содан кейін шпатель батырады банкке дезинфекциялау ерітіндісі бар. Тостаған переворачивают, надписывают және термостатқа вверх дном болдырмау үшін blur өсіп келе жатқан колонияларының ортаға майлы тамшылы конденсациялық суды үлкен көлемде скапливающимися ішкі бетіндегі қақпақтары кезде оның жағдайы қалыпты.

Егілген бактериялық ілгекпен. Зерттеу сұйықтық жинайды ілгекпен және прикасаясь қабырғасына пробиркалар тастайды, қаралау, оның саны. Петри шыны аяқты с агаризованной ортасын орналастырады үстелде вверх дном. Донную бөлігі тостаған ұстап, сол жақ қолмен тігінен, петледержатель – үлкен және сұқ саусақпен оң жақ қолына және қозғалыстарымен келтіреді параллель штрихтар бүкіл бетінің диаметрі ортаны [3].

1.2 Санитарлық-бактериологиялық зерттеу ауаның

Атмосфералық ауада бар көптеген микробтар топырақ, сапрофиттердің, шардара ауа бірге мельчайшими бөлшектер топырақ. Олардың арасында орналасқан спорообразующие таяқшалар, пигментті бактериялар, саңырауқұлақтар мен ашытқы.

Ауада және жабық үй-жайларын қандай да бір микроорганизмдер тұрақты мекендейтін көп мөлшерде на шырышты, жоғарғы тыныс алу адам. Олар бөлінеді кезде қоршаған ортаға чиханье, смехе, жөтелу және сөйлесу мельчайшими бөлшектермен сілекей және носоглоточной шырыш.

Бар науқастардың оқшаулау патологиялық үрдістің ауыз қуысы және жоғарғы тыныс алу жолдарында қатар шартты патогенді микроорганизмдермен – стафилококками және зеленящими стрептококками – бөлінеді қоршаған ортаға патогенді микробтар — гемолитические стпертококктар А тобындағы бактериялар дифтерия, көкжөтел, туберкулез және т. б. байланысты этиологиялы аурулар. Микробиологиялық талдау ауаның патогендік флораға ғана жүргізеді эпидемиялық көрсеткіштері бойынша.

Күнделікті санитарлық-гигиеналық бағалау ауаның анықтайды:

1. жалпы саны микробтардың тұрған ауаның 1 м3;

2. саны сол көлемдегі ауаның санитариялық-көрсеткіштік микроорганизмдер. Концентрациясы бойынша осы микробтардың дәрежесін анықтайды ауа ортасының ластануын ұқсас, титру ішек таяқшасының бағалайды ауыз судың сапасы.

Табу ауада және жабық үй-жайларды деректер микробтардың белгілері бар патогенділік көрсеткіші болып табылады эпидемиялық қолайсыздық осы объект.

Норматив бойынша бағалау бактериялық ауаның ластану қазіргі уақытта жоқ. Критерий бағалау үшін таза және ластанған ауаның тұрғын үй, невентилируемых үй-жайларда (кесте. 1 және 2) қабылданған көрсеткіштері ұсынылған А. И. Шафиром [4].

2. ОБЪЕКТІЛЕРІ МЕН ЗЕРТТЕУ ӘДІСТЕРІ
2.1 Объектілері
Микробиологиялық талдау жасау күні мынадай үй-гимназиясының: сынып бөлмесі, дәліз, асхана, спортзал (сур. 1). «Сыныптық бөлмеде, дәлізде зерттеу жүргізу үшін материал алынды әр түрлі кезеңдерде оқу. Мазмұнын зерттеу микроорганизмдердің санын ауада жүргізілді 3-дық қайталануды.

2.2 зерттеу Әдістері

Дәрежесін анықтау үшін ауаның ластануы жабық үй-жайларда пайдаланылған екі түрлі қоректік орталарды: ГРМ – агар және Агар – Эндо – ГРМ.

1-кесте. Бағалау критерийлері ластану үй-жайлардың саны бойынша микроорганизмдердің 1м3 ауаның

Бағалау ауаның Жазғы режимі Қысқы режимі
Барлығы микроорганизмдер Санитарлық-көрсеткіштік микроорганизмдер Барлығы микроорганизмдер Санитарлық-көрсеткіштік микроорганизмдер
Таза 1500 16 4500 36
Лас 36 2500 7000 124

2-кесте. Санитарлық-микробиологиялық нормативтері ауа хирургиялық бөлімшелерінде

Үй-жай жұмыс Шарттары Рұқсат етілген көрсеткіштері
Микроб саны 1м3 Мазмұны
Патогенді стафилококктар
Патогенді

стрептококктарға

Операциялық

Операцияалды және таңу

Палата

Кезде шағын операциялар

Операциялар кезінде орталық жүйке жүйесінде

Операция басталғанға дейін

Кейін

операциялар

Басталғанға дейін

жұмыс

Жазда

Қыста

Жоғары емес 700

Жоғары емес 15-70

Жоғары емес 500

Жоғары емес 1000

Температурасы 750

Кемінде 3500

Кемінде 5000

Тиіс

қамтылуы

«250л

Сол

Кемінде 24

Кем 52

Тиіс

қамтылуы

«250л

Сол

Менее16

Кемінде 36

Нәрлендіретін құрғақ агар микроорганизмдерді өсіруге арналған (ГРМ — агар).

Құрамы панкреотический гидролизат балық ұнын…24,0

грамм хлорлы натрий…………………………. …..4,0

«1л судың микробиологиялық агар………………..12,0+ 2,0

Дайындау тәсілі қоршаған орта:

38,0 г ұнтақ размешать 1 л дистилденген суды қайнату 1-2 минут дейін толық балқыту агар ағашы, сүзу арқылы мақта-марля сүзгі, разлить стерильді флакондар және стерилизовать автоклавтаумен t = 1210С 15 минут ішінде. Ортасына дейін тоңазытқышта t = 45-500C, разлить стерильді Петри қалыңдығы 4-5 мм. суығаннан Кейін орта тостаған подсушить t = 37+ тартымды клер 10c ішінде 40-60 минут.

Сурет 1 – Мектеп-жайларға талдау жүргізілді. «А» – сынып бөлмесі, Б – дәліз, асхана, спортзал

Нәрлендіретін құрғақ сәрсенбі бөлу үшін энтеробактериялар (Агар – Эндо — ГРМ).

Құрамы панкреотический гидролизат балық ұны……12,0

граммен сығындысы пекарных ашытқы……………………..1,0

«1л су: хлорлы натрий…………………………………3,4

лактоза…………………………………………….10,0

кристалды натрий…………………………………….0,8

натрий фосфорнокислый 2 – замещенный………0,5

негізгі фуксин…………………………………..0,2

агар……………………………………………10,0+ 2,0

Дайындау тәсілі қоршаған орта:

36,7 г ортаның размешать 1 л дистилденген су, кипять 2 — 3 минут дейін толық балқыту агар ағашы, оны жекешелендіру арқылы мақта-марля сүзгі, қайтадан қайнатыңыз, тоңазытқышта дейін t = 46-500С және разлить стерильді Петри қабатымен 5-6мм. суығаннан Кейін орта тостаған подсушить t= 37+ тартымды клер 10c ішінде 40-60 минут.

Ең ескі әдісімен микробиологиялық талдау ауаның болып табылады седиментационный әдісі (әдісі-тұну Кох). Оның ғана пайдаланады зерттеу кезінде ауаның жабық үй-жайлар. Бұл үшін Петри қоректік ортасы зерттеу кезінде жалпы бактериялық ауаның ластану қалдырады ашық сынамаларды іріктеп алу орындарында 5-10 минут ішінде. Аяқталғаннан кейін экспозиция тостаған жабады және термостатқа салады 370С температурада 24 сағат жібітеді, содан соң бөлме температурасында ұстайды, тағы тәулігіне. Дәрежесі туралы ауаның ластану сотталуда саны бойынша колониялар. Бұл әдіс үшін жарамды салыстырмалы бағалау ауа тазалығының [6].

2.3 есептеу Әдістемесі

Есепке алу егу бактериялардың ауадан арқылы жүргізеді санау колониялар бактериялар жеке-жеке. Біле алаңы Петри анықтауға болады микроорганизмдер саны 1м3 ауаның. Бұл үшін: 1) көлемі анықталады қоректік ортаны чашке Петри формула бойынша πr 2; 2) есептейді колониялар саны алаңында 1 дм2 ; 3) пересчитывают саны бактериялардың 1м 3 ауаның [5].

Болжамды есептеу. В чашке Петри диаметрі в10 см-ға өсті 25 колония.

1) анықтайды алаңы қоректік ортаны чашке Петри формула бойынша 3,14*52 немесе 3,14*25 = 78,5 см2

2) есептейді саны колониялардың көлемі 1 дм тең 100 см2

25колоний – 78,5 см2

х=25*100/78,5=32 колониялар

х колония – 100 мм2

яғни алаңында 1 дм2 бар 32 колония.

3) пересчитывают саны бактериялардың 1м3 ауа-ге тең 1000л. Қамтылған 32 колониялар бактериялар алаңында 1 дм2 сәйкес келеді, көлемі 10л ауа. Білу үшін саны в1м3 ауаны құрайды пропорциясы:

32 – 10

х=32*1000/10=3200

х – 1000

Демек, в1м3 ауа ұсталады 3200 бактериялық торпақ.

3. НӘТИЖЕЛЕРІ ЖӘНЕ ТАЛҚЫЛАУ
Зерттеу барысында әрбір микробиологиялық бағалау пайдаланылды үш Петри. Колония микроорганизмдердің выросших ортада ГРМ-агар, ұсынылған суреттерде 2-5. Атап өту қажет, бұл қолдану ортасы Эндо көрсетті болмауы ішек таяқшалары зерттелген мектеп үй-жайларда.

Негізінде санау колониялардың выросших » чашках Петри, дәріс мазмұнын бағалау микроорганизмдердің қамтылған, ауада әр түрлі үй-жайларды түрлі кезеңдерде оқу. Алынған нәтижелер кестелерде көрсетілген 3-5.

2-сурет – Микробиологиялық талдау: А – сынып, кабинет Б – мектеп дәлізін, – асхана, спортзал

3.1 Салыстырмалы талдау мектеп үй-жайлардың бір уақыт кезеңі

Бірінші кезеңде зерттеу өткізілді салыстыру деректер алынған әр түрлі үй-жайларда шамамен бір уақыт кезеңі – 4-ден 5-ке дейін үзіліс. Кесте 3 және сурет 3 жақсы көрінеді, бұл ең аз саны микроорганизмдер (1571) анықталды, сынып бөлмесінде, ал ең көбі (16220) – спорт залы.

3-кесте. Микроорганизмдер саны нормаларындағы, солардың 1м3 ауаның мектеп үй-жайлар

Үй-жай 1-ші кесе 2-ші шыны аяқ 3 шыны аяқ, Орта
Сынып 1910 637 2165 1571 + 473
Дәліз 3949 3439 1371 2920 + 788
Асхана 5222 29 5605 4585+ 836
Спортзал 23439 8407 16814 16220 + 4350
Алайда атап өту қажет, бұл анықталған айырмашылықтар арасындағы сыныппен және дәліз, сондай-ақ, дәліз және асхана жоқ, анық бойынша t-Стьюдент критерийі. Сондай-ақ қосу керек негізге ала отырып, әдеби деректер (1-кесте), бұл үй-жайлар қатарына кіргізуге болады «таза». Арасында қарастырылған үй-жайларды ғана спортзал ретінде қарастырылуы мүмкін қатысты «лас». Шамасы, бұл сабақ, дене шынықтыру, қимыл-қозғалыс ойындары әкеледі көтеруге шаң, демек және микроорганизмдер, тұрған онда. Айырмашылықтар салыстырылатын жұппен үй – класс-спорт залы, дәліз-спортзал мен асхана-спорт залы болып табылады дәйекті 1% немесе 5% маңыздылығы деңгейі.