Состояние и проблемы туберкулеза крупного рогатого скота
Приоритетное значение своевременной и точной диагностики в системе мероприятий по борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота буквально неоспоримо. В.М. Авилов (1999 г.) справедливо отметил, что совершенствование диагностики — основной путь к осуществлению и интенсификации эпизоотологи-ческого мониторинга туберкулеза. Основным методом диагностики был и остается аллергический. В 1965 г. это признала представительная конференция специалистов по борьбе с туберкулезом крупного рогатого скота из стран — членов МЭБ. По данным СП. Качановой (1987 г.), туберкулиновый тест остается за рубежом основным диагностическим методом, особенно при контрольных исследованиях стад.
Мнение абсолютного большинства российских исследователей, фактически, едино: на данном этапе туберкулиновая проба остается основным методом прижизненного выявления животных, зараженных возбудителем туберкулеза. Естественно, в течение последних десятилетий практически не прекращались исследования, направленные на совершенствование аллергенов. С августа 1982 г, в России выпускается только моноштаммный туберкулин из штамма М. Бовис. Он активен и по видовой специфичности превосходит туберкулин из микобактерий бычьего и человеческого видов (В.М. Безгин, 1999 г., Д.Д. Новак, 2000 г., и др.).
Очень важным этапом в деле повышения эффективности диагностики была разработка очищенного ППД-туберкулина и КАМ (комплексного аллергена из атипичных микобактерий). Следует особо отметить разработку сотрудников ВГНКИ — внедрение методики изготовления ППД-туберкулина с использованием селекционных штаммов (И.П. Овдиенко и соавторы, 1999 г.). Обобщенная оценка аллергенов, выпускаемых в настоящее время Курской биофабрикой, дана в работе Н.С. Шевырева и соавторов (1999 г.). Отмечается, что эти туберкулины обладают повышенной биологической активностью, специфичностью и не формируют при многократном введении иммунный ответ у здоровых животных.
Однако в последние годы вопрос о специфичности реакции на туберкулин для млекопитающих пришлось пересматривать. При контрольных исследованиях благополучных стад стали выявлять все больше и больше реагирующих животных, у которых туберкулез не подтверждался при проведении после-убойной экспертизы и узаконенных лабораторных исследований. Возникло и остается чрезвычайно актуальной проблема неспецифических реакций на туберкулез.
Причиной этих реакций большинство исследователей считают инфицированность животных атипичными микобактериями многих видов, широко распространенными в природе и имеющими общие антигены с микобактериями туберкулеза бычьего вида, используемого при изготовлении туберкулина (Ю.Я. Кассич и соавт., 1991 г.; В.А. Соловьев и Н.П. Овдиенко, 1991 г.; Н.П. Овдиенко и соавторы, 1999 г.). Реакции, инфицируемые атипичными микобактериями, получили название параспецифических.
Немало сообщений и о псевдоаллергических реакциях на туберкулин, якобы возникающих при некоторых гельминтозах, развитии гнойно-воспалительных процессов, при длительных транспортировках животных, при резкой смене типа кормления (М.В- Харитонов, М.А. Сафин, 1999 г., и др.),
С другой стороны накопилось немало данных о сбоях аллергической диагностики у больных туберкулезом животных. Это связывают состояниями анергии, толерантности, с явлением латентной персистенции возбудителя в организме животного. Так, инфицирование в неонатальном и раннем постнатальном периоде, исключает реакцию на туберкулин на всем протяжении производственной эксплуатации животного (А.С. Донченко, 1998 г., А.С. Донченко, ЯЛ. Донченко, 2000 г.). Одновременно активизировались исследования, направ*; ленные на повышение диагностической ценности внутрикожной’ аллергической пробы за счет изменения доз и кратности введения туберкулина, за счет оптимизации критериев оценки реакции. А.Х. Найманов (1999 г.) очень точно определил принципиальную сущность этих подходов: в благополучных хозяйствах повышать специфичность методов диагностики, а в неблагополучных — их чувствительность. Оказался дискуссионным и вопрос об оптимальной диагностической дозе туберкулина. В. А. Б’усол и соавт. (1991 г.), Н. Ярбаев (1993 г.), А.И. Кузин и А.К. Семина (1995 г.) и многие другие исследователи последовательно выступали за снижение этой дозы, позволяющее уменьшать число неспецифических реакций. А.С. Донченко и соавторы (1995 г.) показали, что в благополучных хозяйствах снижение дозы туберкулина до 5000 ТЕ сокращает число реагирующих животных почти в 4 раза. Для выявления больных вполне достаточно даже 2500 ТЕ (Н.П. Овдиенко и сотрудники, 1995 г., 1996 г.). Кстати, именно эта доза признана оптимальной при контрольных исследованиях скота в Чехии и Словакии (М, Павлас, 1991 г.).
Все перечисленные исследователи выступали за снижение дозы аллергена и при исследовании неблагополучного поголовья — прежде всего в стадах, близких к оздоровлению. Одновременно предлагалось смягчение критерия оценки реакции на туберкулин у скота благополучных хозяйств — учет утолщения кожной складки с 5мм. Г.А. Юдин выступил с этим предложением еще в 1990 г. Его поддержали Ю.И. Смолянинов и A.M. Падалица (1995 г.), А.И. Кузин и Л.К. Семина (1995 г.). Можно считать компромиссным мнение А.Н. Шарова (1995 г., 1996 г.), который предлагал сохранить критерии оценки аллергических реакций, не менять дозу туберкулина при исследовании скота неблагополучных хозяйств, но уменьшить ее (до 5000 ТЕ) в благополучных стадах.
Было уделено внимание к оптимизации сроков контрольных диагностических исследований. Оказалось, что в условиях Западной Сибири, например, это январь-февраль и июль-сентябрь (А.С, Донченко и Н.А. Донченко, 2000 г.). Перспективно использование ИФА. Этот метод отличается простотой и быстрым получением результатов. В ВИЭВ разрабатывается ИФА в целях идентификации микобактерий. А.Х. Найманов и соавторы (1999 г.) в опытах на овцах показали, что результаты ИФА с видовыми антигенами (соникатами) могут служить дополнительными доказательствами инфицированности животных. Т.Р. Якупов и соавторы (1999 г.) установили, что непрямой твердофазный метод ИФА с антигенами — глико-протеинами клеточных стенок микобактерий может быть перспективным для дифференциальной диагностики.
В последние годы уделяется очень много внимания методам анализа генома. Н.П. Овдиенко и соавторы (1999 г.) считают разработки методов диагностики. туберкулеза с применением ПЦР и ДНК-зондов чрезвычайно важной задачей. Предварительная апробация свидетельствует о высокой чувствительности и специфичности этих методов. А.Н. Шаров и сотрудники (1999 г.) признают, что существующие тест-системы ПЦР позволяют не только обнаруживать возбудителя туберкулеза в различных тканях и жидкостях организма, но и одновременно и дифференцировать М.бовис и М.туберкулезис. Эти исследователи считают, что в принципе ПЦР способна заменить все методы лабораторной диагностики туберкулеза, В то же время есть опасность получения ложноотрицательных (при малом объеме проб) и ложноположительных (при контаминации лабораторной посуды, например) результатов. И.Ф. Випшяков и С.Ж. Цыбанов (1999 г.), соглашаясь с возможностью успешного решения задач дифференциации возбудителей, отмечают, что методы анализа генома не могут в полной мере заменить современные классические серологические и иммунологические методы диагностики. С этим трудно не согласиться.
Эффективность лабораторных (бактериологических) исследований на туберкулез находится в определенной зависимости от качества представляемого материала. При наличии характерных поражений, фактически, не возникает проблем. Но при отсутствии видимых изменений рекомендуется отбирать не только заглоточные, подчелюстные, бронхиальные, средостенные, но и брыжеечные лимфоузлы и лимфоузлы области илеоцекального соединения. Если туберкулезные очаги в 96% случаев локализуются в бронхиальных, средостенных лимфоузлах и легких, то мезентеральные лимфоузлы и особенно — лимфоузлы области илеоцекального соединения, являются излюбленными местами локализации М.авиум, М.паратуберкулезис и атипичных микобактерий (Н,П. Овдиенко, 1986 г.; В.А. Соловьев и Н.П. Овдиенко, 1991 г.; Д. Д. Новак, 1995 г., 2000 г.).